抗體公司在抗體定制過程中,采用哪些技術(shù)來保證抗體的高親和力和高特異性?比如在抗體篩選階段,會運用哪些先進的篩選方法和平臺?
日期:2025-09-28 09:35:50
抗體公司在抗體定制過程中,會采用多種技術(shù)來保證抗體的高親和力和高特異性,在抗體篩選階段也有一系列先進的篩選方法和平臺,具體如下:
1、抗體定制過程中保證抗體高親和力和高特異性的技術(shù)
抗原設(shè)計與制備:精心設(shè)計抗原,確保其具有良好的免疫原性和正確的空間構(gòu)象,如選擇合適的抗原表位、對抗原進行修飾或融合等,以便誘導(dǎo)動物產(chǎn)生高親和力和高特異性的抗體。
免疫動物選擇:根據(jù)需求選擇合適的免疫動物,如兔子、小鼠等。例如,兔子具有獨特的B細胞成熟機制、強大的免疫反應(yīng)、高遺傳異質(zhì)性等特點,能產(chǎn)生比小鼠更具多樣性和高親和力的抗體。
細胞融合技術(shù):如雜交瘤技術(shù),將免疫動物的B細胞與骨髓瘤細胞融合,形成既能無限增殖又能分泌特異性抗體的雜交瘤細胞。金斯瑞的MonoRab™平臺就采用兔鼠異源雜交瘤技術(shù),保證了成熟B細胞的無限增殖,同時維持了抗體的天然重鏈和輕鏈配對,有助于產(chǎn)生高特異性和高親和力的抗體。

2、抗體篩選階段的先進篩選方法和平臺
噬菌體展示技術(shù):將抗體基因片段克隆入噬菌體外殼蛋白結(jié)構(gòu)基因,使抗體與外殼蛋白融合表達并展示在噬菌體表面。通過多輪篩選,淘選陽性噬菌體,獲得目標抗體序列。近岸蛋白擁有成熟的噬菌體展示技術(shù),具有庫容量大、篩選通量高的特點,其半合成全人源庫庫容可達10^{11},獲得的抗體親和力可達10^{-12}M。
單B細胞篩選技術(shù):基于流式細胞術(shù)(FACS)及其他檢測分析平臺,分選出目標單個B細胞,提取其RNA反轉(zhuǎn)錄得到cDNA,PCR獲取抗體序列,再通過ELISA及BLI等檢測平臺對抗體進行活性和親和力分析。百普賽斯的單B細胞抗體開發(fā)服務(wù)平臺能實現(xiàn)對特定B細胞的高特異性篩選,保留抗體重鏈和輕鏈的天然配對,提高抗體的親和力和功能性。
酵母展示技術(shù):如Elpiscience的ElpiSource™全人源抗體Fab庫,基于酵母展示技術(shù),庫容規(guī)模高達百億級。該平臺使用流式細胞儀控制分選策略,可用于多種類型的抗體篩選,無需動物免疫,能將從靶點到抗體篩選的周期縮短至2-3個月,且篩選后無需人源化改造,避免了潛在的抗體親和力變化。
高通量篩選技術(shù):結(jié)合單細胞抗體篩選與單B細胞克隆技術(shù),能夠在短時間內(nèi)處理成千上萬個單B細胞樣本,實現(xiàn)快速抗體發(fā)現(xiàn),并通過深度測序與大數(shù)據(jù)分析,精準篩選出滿足靶點特異性需求的候選抗體。






