桿狀病毒-昆蟲細胞表達與純化服務

桿狀病毒-昆蟲細胞表達系統(BEVS)屬于真核表達系統的一種，該表達系統具有較高的安全性，并且基因組比較大，可以插入較大的外源基因，在大分子量的蛋白表達方面具有很大優勢。并且具有完備的翻譯后加工修飾和高效表達外源基因的能力。該系統由轉移載體、桿狀病毒載體和宿主細胞組成。該系統采用一個或多個桿狀病毒的超強啟動子，將外源目的基因插入到啟動子后，獲得重組病毒，這種重組病毒在昆蟲細胞復制的同時，使外源基因得到高效表達。BEVS被廣泛應用于病毒疫苗開發（如流感病毒和HPV疫苗開發）、信號蛋白制備、細胞因子制備、激酶開發等方面。

系統優勢服務優勢我們承諾服務內容特色表達體系案例展示

系統優勢

基因容量大，可攜帶較大的基因片段，表達大分子量蛋白有優勢；
安全性高，桿狀病毒具有嚴格的種屬特異性；
表達效率高，在被感染的晚期細胞中，蛋白可進行高效地表達；
表達產物的翻譯后修飾，尤其糖基化修飾與哺乳動物細胞類似，表達產物具有生物活性的可能性較高；
桿狀病毒較易擴增，可以大規模生產重組蛋白。

服務優勢

華美生物獨有的表達體系，可實現bacmid低成本、大體積懸浮轉染，且滴度高,可用于感染放大制備蛋白，較經典流程周期可縮短1-2周；
高性價比，價格低至6500元起；
貨期短：最短35工作日即可交付；
產量高，最高可達100mg/L。

我們承諾

無風險定制，不成功不收費

注：該無風險定制蛋白服務僅適用于800個氨基酸以內的蛋白質。如果您需要表達超過800個氨基酸的蛋白質，我們將按步驟收費。

服務內容

步驟	服務項目	服務說明		華美生物特色	周期
1	質粒構建	密碼子優化全基因合成		多載體優化為了提高表達成功率以及獲得更高表達量，進行多信號肽優化，在確保純度的同時更大程度保證了蛋白的活性。	8-12工作日
		PCR擴增產物通過酶切連接到pFastbac1等載體上
		轉化TOP10宿主
		獲得測序正確的重組質粒
2	重組Bacmid及高滴度病毒制備	轉化DH10Bac構建重組Bacmid，PCR鑒定，提取Bacmid。		懸浮轉染懸浮轉染方式大大提高了蛋白表達量，有效縮短實驗周期	9-11工作日
2	重組Bacmid及高滴度病毒制備	重組Bacmid轉染昆蟲細胞，得到P0代病毒，電泳檢測表達量，如有需要再將P0代病毒感染細胞得到P1-P2代病毒		懸浮轉染懸浮轉染方式大大提高了蛋白表達量，有效縮短實驗周期	9-11工作日
3	擴大表達與純化	P1或p2代病毒感染昆蟲細胞		優化表達經過優化后，通過一步轉染培養最快5天內即可得到大量的目的蛋白，低代數的病毒毒液感染細胞即可得到大量目的蛋白	8-10工作日
3	擴大表達與純化	通過親和、離子交換、疏水及分子篩等多種層析方法純化目的蛋白			8-10工作日
4	其他（可選）服務	收費	酶切去除標簽服務	靈活的附加服務提供多種附加服務，客戶可根據實驗需求靈活選擇	3個工作日
4	其他（可選）服務	免費	可提供無菌操作、內毒素去除和凍干等服務（備注：凍干與無菌操作不可同時滿足）	靈活的附加服務提供多種附加服務，客戶可根據實驗需求靈活選擇	2個工作日
5	質控	進行純度、濃度等檢查，并提供QC報告		報告詳細為每個項目提供產品說明書及完善的質控報告	3-5工作日
總時間					28-38工作日