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DSG3:新興的腫瘤相關粘附因子,尋常天皰瘡PV臨床診斷的特異性標記物!

日期:2023-09-28 13:46:07


DSG3是DSGs家族成員之一(DSG1DSG2、DSG3、DSG4)。它們均屬于細胞粘附分子鈣粘素超家族的成員。近年來對于粘附分子與腫瘤關系的研究逐漸成為一個熱點,主要分為鈣粘素超家族選擇素免疫球蛋白超家族整合素等類型。鈣粘素超家族中的E-cadherin近年來的研究較多,其與腫瘤侵襲發展的關系也較明確被證實。然而,DSG3是一個相對新興的粘附因子,研究已經明確了其作為自身免疫性疾病尋常天皰瘡的特異性抗原的角色。此外,最新的國內外研究也揭示了DSG3在腫瘤中發揮著重要的生物學功能。因此,深入研究DSG3有望為相關疾病帶來的新的診斷和治療方法!


1. 什么是DSG3?

1.1 DSG3的結構

橋粒芯糖蛋白3(Desmoglein 3,DSG3)是橋粒芯蛋白家族DSGs的成員之一,其基因位于人類染色體18q12.1-q12.2區域。橋粒芯糖蛋白Desmoglein 3作為構成橋粒的主要成分之一,參與形成細胞間連接。因而,DSG3屬于細胞黏附分子中的鈣黏素超家族。DSG3相對分子質量約為160 kDa,從DSG的氨基酸序列推論顯示,它和鈣依賴細胞黏附分子有同源性。和典型的鈣粘素一樣,DSG3有5個大約相似的細胞外的結構域,稱為EC1(氨基端)一EC5(梭基端)。DSG3的細胞外結構域含有與其他細胞蛋白相互作用的結構域,這些結構域在維持細胞間的黏附和連接中具有關鍵作用(圖1[1-3]

1.2 DSG3的表達和功能

目前的研究發現,DSG3只見于分布在復層鱗狀上皮表皮層的角質細胞膜上,在顆粒層和顆粒下層中呈優勢表達。DSG3與其它蛋白如DSG1一起形成細胞間的橋粒(Desmosomes),這些橋粒起著維護組織結構的作用,使細胞能夠緊密連接在一起,從而確保組織的完整性和穩定性。此外,DSG3是天皰瘡亞型尋常型天皰瘡(Pemphigus vulgaris,PV)的重要靶點之一。在PV患者中,免疫系統產生抗DSG3的抗體,這些抗體與DSG3結合,干擾了細胞間的連接,導致皮膚和黏膜上的水皰和大皰形成,是PV發病的重要因素之一 [1-4]

DSG3的結構

圖1. DSG3的結構 [3]


2. DSG3相關的信號機制

2.1 DSG3在尋常天皰瘡PV發病中的機制

尋常型天皰瘡的發病機制仍然不清楚,特別是在水皰形成的關鍵驅動因素方面。水皰的形成涉及多個細胞內信號事件(例如Src、p38MAPK、PKC、ERKBaxFasLBcl-2等)、DSG3降解、細胞凋亡,以及促進自身抗體產生的遺傳因素 [5-7]。綜合研究表明,DSG3在維持角質形成細胞-細胞間的粘附上起重要作用,特異性抗體與DSG3結合可干擾這種細胞-細胞間的粘附,而導致皮膚棘層松解,被認為是PV發病的關鍵步驟。然而,尚不完全了解DSG3在PV發病中介導細胞內信號傳導的具體機制。

一項研究揭示,尋常型天皰瘡(PV)患者的血清中含有特定的免疫球蛋白PV-IgG,可以特異性地靶向DSG3,導致p53蛋白的表達上升。為了驗證這一特異性效應,研究人員進行了額外的實驗。其中一種實驗使用了PV患者的血清,其含有多克隆抗體,這些抗體針對DSG3抗原。另一種實驗使用了一種已知特異性結合DSG3粘附位點的單克隆抗體,名為AK23。這兩種實驗方法的結果均表明,當細胞暴露于PV血清或AK23處理時,p53的表達顯著上升,同時DSG3蛋白水平下降。這表明PV-IgG或AK23引發的p53上升與DSG3的特異性干擾相關。這些實驗結果強烈支持了PV中DSG3/p53通路的激活,并提示這一通路可能在PV的病理過程中發揮作用(圖2[5]

角質細胞中的DSG3減少誘導p53激活模型

圖2. 角質細胞中的DSG3減少誘導p53激活模型 [5]

2.2 DSG3在腫瘤中的調控機制

目前關于DSG3在癌癥中的生物學功能及機制作用還知之甚少。一項研究揭示,在鱗狀細胞癌中,DSG3調節c-Jun/AP-1的活性以及蛋白激酶C(PKC)-介導的Ezrin-Thr567的磷酸化,導致癌細胞的運動能力增強,從而促進癌細胞的轉移 [8]

具體而言,DSG3會與Ezrin在質膜上形成復合物,這對其與F-actin和CD44相互作用的正常功能至關重要,當敲除DSG3,這些相互作用就會受到干擾。DSG3過表達細胞中Ezrin磷酸化增加,可被多種絲/蘇氨酸激酶的藥理抑制劑大幅抑制(eg. PKC和Rho激酶)。此外,在DSG3過表達細胞中發現了c-Jun S63磷酸化的顯著增加。綜上所述,這項研究揭示了一種新的DSG3調控機制,它涉及c-Jun/AP-1的活化以及依賴于PKC的Ezrin磷酸化過程,這些機制可能是導致DSG3相關癌轉移的原因之一(圖3[8-10]

DSG3通過PKC/AP-1調控Ezrin的磷酸化,促進腫瘤細胞的浸潤

圖3. DSG3通過PKC/AP-1調控Ezrin的磷酸化,促進腫瘤細胞的浸潤 [6]


3. DSG3在疾病中的作用

3.1 DSG3與自身免疫性皰病

天皰瘡是一種罕見的、慢性的、反復發作的皮膚疾病,其特征是在正常皮膚和黏膜上形成松弛的水皰。PV發病分為兩個階段:首先是低滴度的自身抗體出現,然后抗體滴度上升,隨后出現臨床癥狀。臨床上,天皰瘡分為四個主要類型:尋常型天皰瘡、落葉型天皰瘡、副腫瘤性天皰瘡和IgA型天皰瘡。尋常型天皰瘡(Pemphigus vulgar,PV)是天皰瘡中最常見的亞型,其特點是在表皮細胞的橋粒上存在自身抗體。PV以其嚴重的臨床癥狀而聞名,不僅影響皮膚和黏膜,還引起嚴重的并發癥,如低蛋白血癥、感染甚至敗血癥。目前認為,PV的癥狀主要是由DSG1和/或DSG3 IgG抗體引起 [11-13]

研究表明,DSG3的致病性與PV的嚴重程度之間存在著密切的相關性。在PV患者血清中常可檢測出抗DSG3抗體。PV皮膚病損嚴重程度與DSG1抗體水平呈正相關,即皮膚病損越嚴重DSG1抗體水平越高。黏膜病損嚴重程度與DSG3抗體水平呈正相關,口腔黏膜病損越嚴重DSG3抗體水平越高。目前,在臨床檢驗上,采用間接免疫熒光(indirect immunofluorescence,IIF)方法檢測患者血清中總的循環抗體,但是并不能明確到究竟是哪一種致病性靶抗原引起水皰的發生 [14-16]

隨著科學技術的發展,如今已經明確DSG1,DSG3和BP180BP230這些靶抗原能直接導致大皰性皮膚病的發生。國內外文獻的綜合分析表明,ELISA方法在檢測DSG3方面的應用逐年增加,具有高敏感性和高特異性,而且操作簡單、結果判定客觀,對準確檢測天皰瘡抗體以及區分PV和其他類型的天皰瘡提供了診斷依據,是一種較好的臨床輔助診斷方法 [17-19]

3.2 DSG3與腫瘤

DSG3是尋常天皰瘡的特異性抗原,目前國內外的絕大多數文獻報道都是有關這方面的。然而,國外的一些最新研究顯示、DSG3與某些腫瘤的發生、預后密切相關。一項對同一細胞株DJM-1的研究發現,“DSG3耗竭的橋粒”可能不足以維持表皮細胞間的正常黏附強度,導致皮膚出現多種病變 [20-21]。利用全基因組芯片構建基因表達譜結合SqRT-PCR等實驗研究,篩選出與鼻咽癌發病相關的候選靶基因,高表達的DSG3被認為是重要的促瘤因素 [22];在人鱗狀細胞癌中,細胞間橋粒明顯減少,患者血清中DSG3可作為人鱗狀細胞癌診斷及鑒別診斷的指標 [8]

在肺癌中,近些年研究比較多而且比較成熟的指標有CD44v6,MMPs,TIMPs,p53,VEGFEGFRCOX-2[23],利用免疫組化法監測DSG3在非小細胞肺癌患者中的表達,結果提示,DSG3與腫瘤的病理類型、分化程度有相關性,分化程度高組陽性表達高于分化程度低組;DSG3與患者生存率有關,表達陽性組的生存率高于陰性組。因此,DSG3在肺癌組織中的表達或可作為肺癌預后的一個指標 [23-26]


4. DSG3的臨床研究前景

目前關于DSG3國內的報道相對有限,國外的研究主要集中在DSG3在天皰瘡診療方面的潛力,多款處于臨床階段的靶向DSG3藥物,主要用于免疫系統疾病以及皮膚和肌肉骨骼疾病。新的研究發現,在小鼠的天皰瘡模型中,一種名為Stable/Functional-Induced Regulatory T Cells (S/F-iTregs)的治療方式顯著降低了患者的臨床評分、循環中的抗Dsg3 IgG滴度,以及其它與天皰瘡相關的自身免疫標記物 [27]

此外,從天皰瘡患者的樣本中獲得的S/F-iTregs在體外試驗中也表現出有效抑制自體T細胞增殖的特性 [27]。美國公司Cabaletta Bio, Inc.的DSG3+DSG1 CAART是一款CAR T的免疫療法,正處于臨床前階段,治療免疫性天皰瘡。此外,國外最新的研究揭示了DSG3在腫瘤中發揮調控作用。因此,DSG3作為新興的腫瘤相關粘附因子,在自身免疫性皰病及腫瘤中有重要臨床意義!

為鼎力協助科研和藥企人員針對DSG3在自身免疫性皰病和腫瘤中的臨床應用研究,CUSABIO推出DSG3活性蛋白(CSB-MP007205MOd7CSB-BP007205HUc7),助力您在DSG3機制方面的研究或其潛在臨床價值的探索。

華美CUSABIO DSG3 蛋白

Recombinant Human Desmoglein-3(DSG3),partial (Active) (Code: CSB-BP007205HUc7)

High Purity Validated by SDS-PAGE
CSB-BP007205HUc7 SDS-PAGE

The high purity is greater than 95% as determined by SDS-PAGE.

Excellent Bioactivity Validated by Functional ELISA
High Purity Validated of CSB-BP007205HUc7

Immobilized Human DSG3 at 2 μg/mL can bind Anti-DSG3 recombinant antibody (CSB-RA007205A0HU), the EC50 is 4.552-5.720 ng/mL.

Recombinant Mouse Desmoglein-3(Dsg3),partial (Active) (Code: CSB-MP007205MOd7)

High Purity Validated by SDS-PAGE
CSB-MP007205MOd7 SDS-PAGE

The high purity is greater than 85% as determined by SDS-PAGE.

Excellent Bioactivity Validated by Functional ELISA
High Purity Validated of CSB-MP007205MOd7

Immobilized Mouse Dsg3 at 5 μg/ml can bind Anti-DSG3 recombinant antibody (CSB-RA007205A0HU), the EC50 is 2.624-3.182 μg/ml.


參考文獻:

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