ELISA試劑盒檢測后發(fā)現(xiàn)樣本稀釋倍數(shù)錯(cuò)誤，能否通過公式修正結(jié)果？

日期：2025-08-18 16:44:05

ELISA檢測中若發(fā)現(xiàn)樣本稀釋倍數(shù)錯(cuò)誤，在部分情況下可通過公式修正結(jié)果，但需滿足一定前提條件，且修正結(jié)果的可靠性可能受影響，具體需結(jié)合錯(cuò)誤類型和實(shí)驗(yàn)情況判斷：

一、可嘗試修正的情況（需滿足前提）
若僅為 “稀釋倍數(shù)計(jì)算錯(cuò)誤”（如實(shí)際稀釋了10倍，卻誤按20倍計(jì)算），且樣本稀釋過程符合規(guī)范（如稀釋均勻、無明顯損失或污染），可通過公式反推修正：

正確濃度 = 錯(cuò)誤計(jì)算時(shí)得到的濃度 × 錯(cuò)誤稀釋倍數(shù) / 實(shí)際稀釋倍數(shù)

示例：

實(shí)際操作：樣本應(yīng)稀釋10倍（如10μL樣本+90μL稀釋液），但誤加為10μL樣本+190μL 稀釋液（實(shí)際稀釋 20 倍）。

檢測后：按 “預(yù)設(shè)的 10 倍稀釋” 計(jì)算，得到結(jié)果為 100ng/mL（此為錯(cuò)誤結(jié)果，因?qū)嶋H稀釋倍數(shù)更高，樣本中真實(shí)濃度應(yīng)更高）。

修正：正確濃度=100ng/mL×20（實(shí)際稀釋倍數(shù)）/10（預(yù)設(shè)稀釋倍數(shù)）= 200ng/mL。

二、不建議修正或無法修正的情況
若存在以下情況，修正結(jié)果可能不可靠，建議重新檢測：

稀釋操作本身錯(cuò)誤（非單純計(jì)算錯(cuò)誤）

如 “應(yīng)稀釋 10 倍卻未稀釋直接檢測”“稀釋時(shí)未混勻?qū)е聵颖緷舛炔痪?rdquo;“稀釋液種類錯(cuò)誤（如誤用緩沖液而非樣本稀釋液）” 等。

此時(shí)樣本中目標(biāo)物質(zhì)的實(shí)際濃度與理論稀釋倍數(shù)無線性對應(yīng)關(guān)系，公式修正無法彌補(bǔ)操作誤差（如未稀釋樣本可能因濃度過高導(dǎo)致鉤狀效應(yīng)，結(jié)果本身已失真）。

樣本濃度超出試劑盒線性范圍

若錯(cuò)誤稀釋后，樣本OD值超出標(biāo)準(zhǔn)曲線的最高 / 最低線性范圍（如標(biāo)準(zhǔn)曲線最高對應(yīng)濃度為500ng/mL，而錯(cuò)誤稀釋的樣本按修正公式計(jì)算后濃度為 1000ng/mL），此時(shí)修正結(jié)果無可靠依據(jù)（標(biāo)準(zhǔn)曲線外推誤差極大），需重新調(diào)整稀釋倍數(shù)檢測。

樣本存在干擾因素

若樣本本身有溶血、脂血或基質(zhì)效應(yīng)，錯(cuò)誤稀釋可能改變干擾因素的影響程度（如過度稀釋可能降低基質(zhì)干擾，也可能導(dǎo)致目標(biāo)物質(zhì)濃度低于檢測限），修正后結(jié)果無法反映真實(shí)情況。

三、總結(jié)

僅 “稀釋倍數(shù)計(jì)算錯(cuò)誤” 且樣本稀釋規(guī)范：可按公式修正，但需在結(jié)果報(bào)告中注明修正原因及過程。

涉及操作錯(cuò)誤、濃度超線性范圍或樣本干擾：不建議修正，應(yīng)重新采集樣本或按正確稀釋倍數(shù)重新處理樣本檢測，以確保結(jié)果可靠性。

ELISA實(shí)驗(yàn)中 “稀釋倍數(shù)” 是影響結(jié)果準(zhǔn)確性的關(guān)鍵因素，建議操作時(shí)通過 “雙人核對”“標(biāo)記稀釋比例” 等方式減少錯(cuò)誤，避免后續(xù)結(jié)果修正的麻煩。