外泌體提取工藝步驟
日期：2023-04-03 15:46:10
外泌體提取的一般工藝流程：
細胞培養：首先需要選擇外泌體分泌比較豐富的細胞，如HEK293、THP-1等，進行培養。
收集細胞上清：收集細胞培養上清，可以通過離心或濾過等方式去除細胞碎片和細胞核等雜質。
初步離心：對細胞上清進行初步離心，去除較大的微粒和細胞碎片等，一般采用低速離心（如3000×g，10分鐘）。
超速離心：對初步離心后的上清進行超速離心，去除較小的微粒和小泡，一般采用高速離心（如10000×g，30分鐘）。
濾過：對離心后的上清進行濾過，去除大分子雜質，如細胞核等。
再次超速離心：對濾過后的上清進行再次超速離心，分離出外泌體，一般采用最高速離心（如100000×g，70分鐘）。
懸浮液洗滌：將分離出的外泌體懸浮于PBS等緩沖液中，進行洗滌。
再次超速離心：將洗滌后的外泌體進行再次超速離心，去除洗滌緩沖液和雜質。
終末懸液：將去除雜質的外泌體懸浮于PBS等緩沖液中，形成最終的外泌體提取物。
外泌體提取工藝需要注意去除雜質和細胞碎片等，以保證提取的外泌體純度和活性。同時，外泌體提取也需要根據實驗要求進行優化和調整。
細胞培養：首先需要選擇外泌體分泌比較豐富的細胞，如HEK293、THP-1等，進行培養。
收集細胞上清：收集細胞培養上清，可以通過離心或濾過等方式去除細胞碎片和細胞核等雜質。
初步離心：對細胞上清進行初步離心，去除較大的微粒和細胞碎片等，一般采用低速離心（如3000×g，10分鐘）。
超速離心：對初步離心后的上清進行超速離心，去除較小的微粒和小泡，一般采用高速離心（如10000×g，30分鐘）。
濾過：對離心后的上清進行濾過，去除大分子雜質，如細胞核等。
再次超速離心：對濾過后的上清進行再次超速離心，分離出外泌體，一般采用最高速離心（如100000×g，70分鐘）。
懸浮液洗滌：將分離出的外泌體懸浮于PBS等緩沖液中，進行洗滌。
再次超速離心：將洗滌后的外泌體進行再次超速離心，去除洗滌緩沖液和雜質。
終末懸液：將去除雜質的外泌體懸浮于PBS等緩沖液中，形成最終的外泌體提取物。
外泌體提取工藝需要注意去除雜質和細胞碎片等，以保證提取的外泌體純度和活性。同時，外泌體提取也需要根據實驗要求進行優化和調整。
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